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            3T3-L1細胞培養建議

            【細胞簡介】

            3T3-L1是從小鼠胚胎中分離出來的成纖維細胞,當3T3-L1細胞從快速分裂到長滿接觸抑制時,該細胞經過前脂肪向脂肪樣逆轉,該細胞可用于研究糖尿病、肥胖癥等疾病。 

            圖片1.png

            【細胞特點】

            image.png 

             

            【細胞培養建議】

            l 該細胞在DMEM(含1.5g/LNaHCO3)培養基中生長良好,大部分品牌的DMEM含有較高濃度的NaHCO3(3.7g/L),若使用DMEM(3.7g/L NaHCO3)培養基培養細胞時需要提高CO2濃度(7%-10%),森貝伽推薦使用1640培養基進行培養效果更好。

            l 該細胞起始接種密度應在3000/c㎡ ,并且在細胞達到80%融合或者密度介于5萬-6萬/c㎡ 時傳代,避免細胞完全融合。

            l 3T3-L1這樣具有脂滴的細胞培養過程中受到壓力的表現出現空泡現象時正常的,原因可能是培養基中缺乏谷氨酰胺、添加了抗真菌劑、CO2濃度較低對培養基中碳酸氫鈉的影響或者使用的血清品質較低培養基的營養消耗殆盡。

            l 培養密度一般控制在40-80%的匯合度,過高的匯合度,細胞可能會開始分化。

             

            【細胞常見問題】

            ? 3T3-L1細胞在分化過程中出現異常怎么辦?

               答:細胞密度是影響3T3-L1細胞分化的重要因素,過低或過高的細胞密度都會影響分化效果;密度一般控制在40-80%的匯合度,如果太低,則會影響細胞生長,如果太高,則會導致細胞死亡。

             

            ? 3T3-L1細胞傳代后容易出現細胞老化的情況怎么辦?

               答:在進行傳代時,需要注意細胞的消化過程,該細胞對胰酶比較敏感,添加胰酶后約1-2分鐘內細胞會脫落,因此消化時間的把控極其重要,同時避免過度打碎細胞團,以保證細胞的生長和分化能力。

             



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